使用Nanopore “ Q20+”试剂盒与R10.4测序芯片相结合的测序技术，单链（simplex）准确度可以达到Q20，双链（duplex）可以达到Q30，同时实现了共有序列的高精度识别，使得测序性能大幅度提升，高准确性基因组组装成为可能。

近期，AG代理基因结合“Q20+“试剂盒与R10.4测序芯片，利用不同组装软件（flye、nextdenovo、necat）对基因组进行组装，选取了两个植物样本作为本次的测试数据，实测数据展示如下：

表1利用flye、nextdenovo对植物一进行基因组组装

基于Nanopore R10芯片 100X的测序深度，分别利用flye、nextdenovo软件对植物一基因组进行组装，二代纠错前后，基因组QV值均大于40，且无显著差异，表明使用“Q20+“试剂盒与R10.4测序芯片获得的序列，在组装准确度方面提升明显。

表2 利用flye、necat、nextdenovo对植物二进行基因组组装

基于Nanopore R10芯片 50X的测序深度，分别利用flye、necat、nextdenovo软件对植物二基因组进行组装，组装后基因组QV值在40左右，且二代纠错前后，QV值及各指标并无显著差异。

从测试结果来看，两个植物样本基因组组装mapping rate均大于99.5%，BUSCO均大于94%。经过芯片及算法的升级，QV值得到大幅度提升。相较于旧版R9芯片QV值25-30，本次组装纠错前QV值可以达到40左右，与HIFI组装QV值相差不大（40-50），同时，基于R10芯片50X数据，即可达到Nanopore100X常规数据、HIFI 30X reads的组装质量。此外，二代纠错前后，不同组装软件组装的基因组各指标（QV、BUSCO等）均无明显差异，表明R10组装目前可能不需要二代纠错步骤，即可获得高准确度的基因组。

综上，采用“Q20+“试剂盒与R10.4测序芯片相结合的测序方法，可以在保证数据读长与产出的基础上，同时极大提升基因组组装精确度，有望助力广大科研工作者轻松获得高连续性、高准确度的超高质量基因组！